產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品介紹
Western Blot（WB）是一種基于抗原抗體特異性結合的檢測技術，廣泛用于檢測生物樣品中的特定蛋白質(zhì)。其原理是通過SDS-PAGE電泳分離蛋白質(zhì)后，將蛋白質(zhì)轉移到固相膜（如PVDF或硝酸纖維素膜）上，再利用特異性抗體進行檢測。該方法結合了電泳的高分辨率和免疫檢測的高特異性，可實現(xiàn)對目標蛋白的定性和半定量分析。
蛋白質(zhì)轉印在免疫印跡分析中是重要的一環(huán)，通過將蛋白質(zhì)轉印到濾膜表面，經(jīng)抗體結合、酶標或熒光素標記，可實現(xiàn)檢測目標蛋白的目的。UE的PVDF（聚偏二氟乙烯）轉印膜具有極高的蛋白結合能力，在蛋白質(zhì)轉移過程中捕獲率高，能夠最大程度減少樣品損失，使得最終信號易于檢測。
轉印原理是利用帶負電蛋白（SDS結合）通過電場驅動從負極到正極轉移和蛋白質(zhì)與膜材料之間疏水性結合，從而實現(xiàn)蛋白條帶從PAGE凝膠轉印至PVDF膜的目的，見圖1。
圖1. 轉印原理示意圖
應用范圍
蛋白質(zhì)印跡；核酸印記；點/ 狹縫印跡；氨基酸分析；N 端蛋白質(zhì)測序 ；糖蛋白可視化；脂多糖分析蛋白定量等
產(chǎn)品信息
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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UEL-PF0022 |
PVDF，0.22μm，265mm*3750mm |
1卷 |
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UEL-PF0022S |
PVDF，0.22μm，60mm*90mm |
100片/盒 |
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UEL-PF0022M |
PVDF，0.22μm，140mm*160mm |
50片/盒 |
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UEL-PF0022L |
PVDF，0.22μm，200mm*250mm |
20片/盒 |
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UEL-PF0045 |
PVDF，0.45μm，265mm*3750mm |
1卷 |
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UEL-PF0045S |
PVDF，0.45μm，60mm*90mm |
100片/盒 |
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UEL-PF0045M |
PVDF，0.45μm，140mm*160mm |
50片/盒 |
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UEL-PF0045L |
PVDF，0.45μm，200mm*250mm |
20片/盒 |
儲運條件
未使用的PVDF 膜應密封保存，避免受潮，避免高溫或低溫環(huán)境，避免長時間光照。常溫運輸。有效期見外包裝。
產(chǎn)品特點
強蛋白結合能力，保證轉印效率；
低背景干擾，提高實驗結果清晰度；
表面均勻平整，孔徑均一，條帶清晰平整；
高機械強度，高化學和熱穩(wěn)定性，確保實驗環(huán)境適應性；
易于抗體重復剝離和雜交。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科研，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
自備材料
1. 耗材
轉印結構；濾紙；電泳儀；轉膜槽等
2. 試劑
轉膜液（UE可提供W6174，Western 免冰浴快速轉膜液（10×））；甲醇/乙醇；超純水等
操作步驟
1. 選型
選擇合適孔徑的PVDF膜；
裁剪或使用合適大小的PVDF膜。
*根據(jù)目的蛋白的分子量選擇，0.45 μm 孔徑膜適合 >20 kDa 蛋白質(zhì)，0.22 μm 孔徑膜適合 <20 kDa 蛋白質(zhì)。
2. 預處理
預先用甲醇進行浸泡活化30 s 左右，直至膜由不透明為半透明，隨后需放入轉印緩沖液中平衡至少5 min。
*PVDF膜一定要充分浸泡活化，否則會影響轉印效果，進而導致結果重復性差和數(shù)據(jù)不可信。
3. 安裝
確保PVDF 膜與凝膠之間緊密貼合，沒有氣泡，各層之間平整對齊。
*PVDF膜由氣泡會導致蛋白條帶不平整；“三明治”轉膜結構不緊密，可能會導致條帶無法轉印到PVDF膜上，條帶彌散甚至消失。
*可以通過麗春紅染色液（UE貨號：P6176，麗春紅染色液(1×)）染色PVDF膜，驗證轉膜情況。
關聯(lián)產(chǎn)品
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產(chǎn)品貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
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R6166 |
RIPA裂解液（強，無抑制劑） |
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W6001 |
Western及IP細胞裂解液 |
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S6182 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（10%） |
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S6183 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（12.5%） |
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S6181 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（7.5%） |
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S6184 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（15%） |
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P6163 |
蛋白酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×in DMSO） |
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S6168 |
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液（變性，非還原，5×） |
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B6167 |
BCA蛋白定量檢測試劑盒 |
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B6169 |
BCA蛋白定量檢測試劑盒（即用型） |
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H6161 |
HRP Goat Anti-Mouse IgG(H&L)（HRP羊抗鼠二抗） |
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H6162 |
HRP Goat Anti-Rabbit IgG(H&L)（HRP羊抗兔二抗） |
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S6009 |
Super ECL Plus（超敏化學發(fā)光檢測試劑盒） |
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S6008 |
Super ECL Prime（靈敏化學發(fā)光檢測試劑盒） |
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S6010 |
Super ECL Star（特超敏化學發(fā)光檢測試劑盒） |
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P6220 |
彩色預制蛋白Marker（25-400 kDa，四色） |
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P6221 |
彩色預染蛋白Marker（25-300 kDa，三色） |
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P8028 |
彩色預染蛋白Marker（10-250kDa，雙色） |
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P6222 |
彩色預染蛋白Marker（10-250 kDa，三色） |
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P6110 |
彩色預染蛋白Marker（10-180 kDa，三色） |
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P6224 |
彩色預染蛋白marker（2.7-40kda，三色） |
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PM0409 |
彩色預染蛋白Marker （10-270 kDa，四色） |
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PM0511 |
彩色預染蛋白Marker （10-270 kDa，五色） |
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K8006 |
考馬斯亮藍快速染色液（免脫色） |
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W6174 |
Western 免冰浴快速轉膜液（10×） |
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P6176 |
麗春紅染色液(1×) |
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