產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品介紹
Western Blot（WB）是一種基于抗原抗體特異性結(jié)合的檢測(cè)技術(shù)，廣泛用于檢測(cè)生物樣品中的特定蛋白質(zhì)。其原理是通過(guò)SDS-PAGE電泳分離蛋白質(zhì)后，將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固相膜（如PVDF或硝酸纖維素膜）上，再利用特異性抗體進(jìn)行檢測(cè)。該方法結(jié)合了電泳的高分辨率和免疫檢測(cè)的高特異性，可實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白的定性和半定量分析。
蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印在免疫印跡分析中是重要的一環(huán)，通過(guò)將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印到濾膜表面，經(jīng)抗體結(jié)合、酶標(biāo)或熒光素標(biāo)記，可實(shí)現(xiàn)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的目的。UE的PVDF（聚偏二氟乙烯）轉(zhuǎn)印膜具有極高的蛋白結(jié)合能力，在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移過(guò)程中捕獲率高，能夠最大程度減少樣品損失，使得最終信號(hào)易于檢測(cè)。
轉(zhuǎn)印原理是利用帶負(fù)電蛋白（SDS結(jié)合）通過(guò)電場(chǎng)驅(qū)動(dòng)從負(fù)極到正極轉(zhuǎn)移和蛋白質(zhì)與膜材料之間疏水性結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)蛋白條帶從PAGE凝膠轉(zhuǎn)印至PVDF膜的目的，見(jiàn)圖1。
圖1. 轉(zhuǎn)印原理示意圖
應(yīng)用范圍
蛋白質(zhì)印跡；核酸印記；點(diǎn)/ 狹縫印跡；氨基酸分析；N 端蛋白質(zhì)測(cè)序 ；糖蛋白可視化；脂多糖分析蛋白定量等
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
名稱(chēng) |
規(guī)格 |
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UEL-PF0022 |
PVDF，0.22μm，265mm*3750mm |
1卷 |
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UEL-PF0022S |
PVDF，0.22μm，60mm*90mm |
100片/盒 |
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UEL-PF0022M |
PVDF，0.22μm，140mm*160mm |
50片/盒 |
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UEL-PF0022L |
PVDF，0.22μm，200mm*250mm |
20片/盒 |
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UEL-PF0045 |
PVDF，0.45μm，265mm*3750mm |
1卷 |
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UEL-PF0045S |
PVDF，0.45μm，60mm*90mm |
100片/盒 |
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UEL-PF0045M |
PVDF，0.45μm，140mm*160mm |
50片/盒 |
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UEL-PF0045L |
PVDF，0.45μm，200mm*250mm |
20片/盒 |
儲(chǔ)運(yùn)條件
未使用的PVDF 膜應(yīng)密封保存，避免受潮，避免高溫或低溫環(huán)境，避免長(zhǎng)時(shí)間光照。常溫運(yùn)輸。有效期見(jiàn)外包裝。
產(chǎn)品特點(diǎn)
強(qiáng)蛋白結(jié)合能力，保證轉(zhuǎn)印效率；
低背景干擾，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果清晰度；
表面均勻平整，孔徑均一，條帶清晰平整；
高機(jī)械強(qiáng)度，高化學(xué)和熱穩(wěn)定性，確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境適應(yīng)性；
易于抗體重復(fù)剝離和雜交。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅限于科研，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
自備材料
1. 耗材
轉(zhuǎn)印結(jié)構(gòu)；濾紙；電泳儀；轉(zhuǎn)膜槽等
2. 試劑
轉(zhuǎn)膜液（UE可提供W6174，Western 免冰浴快速轉(zhuǎn)膜液（10×））；甲醇/乙醇；超純水等
操作步驟
1. 選型
選擇合適孔徑的PVDF膜；
裁剪或使用合適大小的PVDF膜。
*根據(jù)目的蛋白的分子量選擇，0.45 μm 孔徑膜適合 >20 kDa 蛋白質(zhì)，0.22 μm 孔徑膜適合 <20 kDa 蛋白質(zhì)。
2. 預(yù)處理
預(yù)先用甲醇進(jìn)行浸泡活化30 s 左右，直至膜由不透明為半透明，隨后需放入轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡至少5 min。
*PVDF膜一定要充分浸泡活化，否則會(huì)影響轉(zhuǎn)印效果，進(jìn)而導(dǎo)致結(jié)果重復(fù)性差和數(shù)據(jù)不可信。
3. 安裝
確保PVDF 膜與凝膠之間緊密貼合，沒(méi)有氣泡，各層之間平整對(duì)齊。
*PVDF膜由氣泡會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶不平整；“三明治”轉(zhuǎn)膜結(jié)構(gòu)不緊密，可能會(huì)導(dǎo)致條帶無(wú)法轉(zhuǎn)印到PVDF膜上，條帶彌散甚至消失。
*可以通過(guò)麗春紅染色液（UE貨號(hào)：P6176，麗春紅染色液(1×)）染色PVDF膜，驗(yàn)證轉(zhuǎn)膜情況。
關(guān)聯(lián)產(chǎn)品
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產(chǎn)品貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
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R6166 |
RIPA裂解液（強(qiáng)，無(wú)抑制劑） |
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W6001 |
Western及IP細(xì)胞裂解液 |
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S6182 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（10%） |
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S6183 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（12.5%） |
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S6181 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（7.5%） |
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S6184 |
PAGE彩色快速凝膠制備試劑盒（15%） |
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P6163 |
蛋白酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×in DMSO） |
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S6168 |
SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液（變性，非還原，5×） |
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B6167 |
BCA蛋白定量檢測(cè)試劑盒 |
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B6169 |
BCA蛋白定量檢測(cè)試劑盒（即用型） |
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H6161 |
HRP Goat Anti-Mouse IgG(H&L)（HRP羊抗鼠二抗） |
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H6162 |
HRP Goat Anti-Rabbit IgG(H&L)（HRP羊抗兔二抗） |
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S6009 |
Super ECL Plus（超敏化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒） |
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S6008 |
Super ECL Prime（靈敏化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒） |
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S6010 |
Super ECL Star（特超敏化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒） |
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P6220 |
彩色預(yù)制蛋白Marker（25-400 kDa，四色） |
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P6221 |
彩色預(yù)染蛋白Marker（25-300 kDa，三色） |
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P8028 |
彩色預(yù)染蛋白Marker（10-250kDa，雙色） |
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P6222 |
彩色預(yù)染蛋白Marker（10-250 kDa，三色） |
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P6110 |
彩色預(yù)染蛋白Marker（10-180 kDa，三色） |
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P6224 |
彩色預(yù)染蛋白marker（2.7-40kda，三色） |
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PM0409 |
彩色預(yù)染蛋白Marker （10-270 kDa，四色） |
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PM0511 |
彩色預(yù)染蛋白Marker （10-270 kDa，五色） |
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K8006 |
考馬斯亮藍(lán)快速染色液（免脫色） |
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W6174 |
Western 免冰浴快速轉(zhuǎn)膜液（10×） |
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P6176 |
麗春紅染色液(1×) |
微信服務(wù)號(hào)