產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品貨號(hào):MAG-PCR-50,MAG-PCR-250
產(chǎn)品規(guī)格:50 rxns、250 rxns
運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸;
保存條件:室溫保存12個(gè)月。
應(yīng)用范圍:適用從PCR產(chǎn)物、酶促反應(yīng)液以及粗制DNA回收高純度DNA。
產(chǎn)品組分
組分 |
MAG-PCR-50 |
MAG-PCR-250 |
MB Mix |
0.5mL |
2.5 mL |
Buffer PB |
50 mL |
250 mL |
Buffer EB |
10 mL |
50 mL |
產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品專為從PCR產(chǎn)物、酶促反應(yīng)液或粗制DNA中快速、輕松地分離50bp~20kb DNA片段而設(shè)計(jì),可獲得極高的DNA濃度。試劑盒采用了磁性納米顆粒固相核酸富集技術(shù),精選高性能納米磁珠,配合精心研制的Buffer體系組合而成,有效去除蛋白質(zhì)、有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子以及寡核苷酸引物等雜質(zhì),最后使用低鹽緩沖液洗脫獲得純化的DNA。使用本產(chǎn)品純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、RT-PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern Blot、分子標(biāo)記、NGS等下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
適用儀器
適用于基于磁轉(zhuǎn)移技術(shù)的32位或96位核酸提取儀。如BIO-DL 32,TIANGEN TGuide S32,TIANLONG NP968-C,Rosetta 96等自動(dòng)化核酸提取儀,也適用于手動(dòng)提取。
實(shí)驗(yàn)步驟
一.首次使用前:
1.自備試劑:異丙醇(AR)、80%乙醇(AR)
操作步驟
1.加入適量的PCR產(chǎn)物或酶促反應(yīng)產(chǎn)物或粗DNA至1.5或2.0mL離心管中。
a)回收>100bp片段,加入5倍體積Buffer PB;
b)回收≤100bp片段,加入5倍體積Buffer PB和2倍體積的異丙醇;
注:a.向50μL PCR產(chǎn)物中加入250μL的Buffer PB;
b.向50μL PCR產(chǎn)物中加入250μL的Buffer PB和100μL異丙醇。
2.加入10μL MB Mix,振蕩渦旋5分鐘。
3.短暫離心,將離心管內(nèi)液體收集至底部,然后將離心管置于磁力架上靜置30秒,待磁珠完全吸附后,用移液器吸棄管內(nèi)液體。
4.加入500μL Buffer PB,1,000rpm渦旋振蕩2分鐘,磁性分離,吸棄上清液。
5.加入700μL 80%乙醇,1,000rpm渦旋振蕩2分鐘,磁性分離,吸棄上清液。
6.瞬時(shí)離心,重復(fù)上述步驟1次。
7.將離心管繼續(xù)保持在磁力架上,放入45~50℃烘箱中,干燥約10分鐘至無明顯乙醇?xì)馕叮ㄒ部墒覝亓栏?,約15分鐘)。
8.揮發(fā)除醇結(jié)束后,向離心管中加入40~80μL Buffer EB,吹散或振散磁珠,56℃振蕩溫浴5分鐘。磁性分離,將洗脫液轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管中,得DNA產(chǎn)物,保存于-20℃。