產(chǎn)品貨號：MAG-BL-GDNA-50，MAG-BL-GDNA-250

產(chǎn)品規(guī)格：50 rxns，250 rxns

儲存條件：PK Soln 2-8℃保存12個月，-20℃長期保存，其它組分室溫保存12個月。

運(yùn)輸條件：常溫運(yùn)輸

應(yīng)用范圍：適用于從抗凝全血或血液白膜層樣本中提取高純度基因組DNA

產(chǎn)品組分

*注：

1）MB Mix G取用前充分搖晃或震蕩，使磁珠懸浮均勻；

2）Buffer DW2為濃縮溶液，使用前請按照瓶身標(biāo)簽提示加入無水乙醇進(jìn)行稀釋

產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品使用超順磁性微球可以特異性的吸附核酸，通過洗滌去除核酸以外的蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。洗脫液解離吸附在磁珠上的核酸，分離純化得到高質(zhì)量核酸。

適用儀器

本試劑盒適用于BIO-DL 32, TIANGEN TGuide S32, TIANLONG NP968-C, Rosetta 96等自動化核酸提取儀，也適用于手動提取。

操作步驟

一．首次使用前：

客戶自備物品：異丙醇（分析純）、80%乙醇

二.樣本前處理：

1.向2 mL離心管中加入25 μL PK Soln。

2.加入250 μL抗凝全血樣本至上述離心管。

注：禽類抗凝血液，取5~10 μL并加入去離子水補(bǔ)足至250 μL，再進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。

3. 加入250 μL Buffer ABL，高速渦旋10秒，70℃振蕩溫浴15分鐘，短暫離心后冷卻至室溫。

注：若有條件可以使用振蕩金屬浴，可預(yù)先將步驟4中20 μL MB Mix G加入到這一步驟，帶著磁珠進(jìn)行振蕩混勻裂解有利于提高DNA得量。

4. 向離心管中分別加入20 μL MB Mix G（提前混合均勻）和350 μL異丙醇，渦旋振蕩5~10分鐘。按【純化步驟】繼續(xù)進(jìn)行后續(xù)操作。

注1)：基因組DNA量較多，有可能出現(xiàn)磁珠聚集現(xiàn)象，為正常現(xiàn)象；

注2)：MB Mix G與異丙醇可預(yù)選混合。

三．純化步驟:手動法

1. 短暫離心，將離心管置于磁力架上靜置30秒。待磁珠完全吸附后，用移液器吸棄管內(nèi)液體。

2. 向離心管中加入500 μL Buffer BW1，1,000 rpm渦旋振蕩3分鐘，磁性分離，吸棄上清液。

重復(fù)上述步驟1次。

3. 加入700 μL Buffer DW2（已用乙醇稀釋），1,000 rpm渦旋振蕩2分鐘，磁性分離，吸棄上清液。

4. 重復(fù)上述步驟1次。

5. 將離心管繼續(xù)保持在磁力架上，放入45~50℃烘箱中，干燥約10分鐘至無明顯乙醇?xì)馕叮ㄒ部墒覝亓栏桑枰L時間）。

6. 揮發(fā)除醇結(jié)束后，向離心管中加入50~100 μL Buffer EB，吹散或振散磁珠，58℃振蕩溫浴6分鐘。磁性分離，將洗脫液轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管中，得DNA產(chǎn)物，保存于-20℃。

四．自動化操作流程

1.將Sample Plate中加入350 μL異丙醇和20 μL MB Mix G（可預(yù)先混合）；

2.在Sample Plate中加入525 μL全部裂解上清液；

3.將96位磁棒套放入到Wash 3 Plate中（必須準(zhǔn)確放入，否則可能損壞磁棒套。此步驟為針對KingFisher Flex，若使用其它品牌儀器請做相應(yīng)調(diào)整）。

4.將試劑板按對應(yīng)順序放入核酸提取儀中，運(yùn)行程序。

5.程序運(yùn)行完畢，轉(zhuǎn)移Elute Plate中DNA至新離心管中，提取過程結(jié)束。

注：若樣本前處理步驟中選擇帶著磁珠進(jìn)行樣本裂解，則該步驟無需再加入磁珠。

【推薦96位核酸提取儀程序參數(shù)】

備注：不同品牌核酸提取儀可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整相應(yīng)的參數(shù)。