產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品貨號：M7421S,M7421M
產(chǎn)品規(guī)格：20 rxns, 100 rxns
儲(chǔ)存條件：在2~8℃下保存，有效期見外包裝
應(yīng)用范圍：用于病毒核酸的提取
產(chǎn)品組分
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組分 |
組分含量 |
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M7421S |
M7421M |
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A.磁珠懸液 |
0.4 mL |
2mL |
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B.裂解液 |
8 mL |
40mL |
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C.洗滌液I（選配） |
7.2 mL（首次使用前加入4.8 mL異丙醇） |
36mL（首次使用前加入24 mL異丙醇） |
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D.洗滌液II |
6 mL（首次使用前加入24 mL無水乙醇） |
25mL（首次使用前加入100 mL無水乙醇） |
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E.洗脫液 |
2 mL |
10 mL |
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F.蛋白酶K |
10mg（首次使用前請加入0.82 mL溶液A） |
50mg（首次使用前請加入4.1 mL溶液A） |
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G.溶液A |
0.82mL |
4.1mL |
產(chǎn)品介紹
含有靶核酸的待分離樣品經(jīng)裂解后，利用磁珠與DNA/RNA分子特異性識(shí)別和高效結(jié)合，并利用磁性分離器或磁棒使磁珠吸附于管壁或磁棒套，通過洗滌、洗脫、純化過程得到所需的DNA/RNA。
適用樣本
新鮮或冷凍的血漿、血清、尿液、分泌液、病毒濃縮液、細(xì)胞培養(yǎng)液上清或無細(xì)胞體液?？闪⒓催M(jìn)行提取，也可于2~8℃保存，保存期不超過24小時(shí)，長期保存需放置在-20℃。使用前請充分混合，防止樣本不均一。
實(shí)驗(yàn)步驟
一．手動(dòng)操作流程
1.首次使用前
（1）在洗滌液I中加入指定量（見瓶身標(biāo)簽）的無水異丙醇（分析純），并于“□”內(nèi)打上“√”，混勻后于室溫下密閉保存。
（2）在洗滌液II中加入指定量（見瓶身標(biāo)簽）的無水乙醇（分析純），并于“□”內(nèi)打上“√”，混勻后于室溫下密閉保存。
（3）在蛋白酶K中加入指定量（見管身標(biāo)簽）的溶液A，并于“□”內(nèi)打上“√”，混勻后保存于2~8℃，或分裝后保存于-20℃。
2.客戶自備物品
（1）1.5 mL離心管：2個(gè)/樣品（DNase/RNase-free）
（2）單通道移液器：2 μL、20 μL、200 μL、1000 μL（DNase/RNase-free）
（3）漩渦振蕩器
（4）恒溫金屬浴（或水浴鍋）：55℃
（5）磁性分離器
（6）異丙醇，分析純級別
（7）無水乙醇，分析純級別
3.操作步驟
（1）裂解與結(jié)合：取一個(gè)新的1.5 mL離心管，加入200μL樣本，再依次加入40μL蛋白酶K（檢查是否已加入溶液A），400μL裂解液，200μL異丙醇和20μL磁珠懸液，調(diào)整合適的轉(zhuǎn)速漩渦振蕩混合均勻，并將離心管置于55℃加熱15 min（每隔5 min顛倒數(shù)次）。然后將離心管置于磁性分離器上靜置1 min，用移液器吸去上清液。
（2）洗滌
a.加入600μL洗滌液I（檢查是否已加入異丙醇），用移液器緩慢吹打磁珠10次或漩渦震蕩10 s，使磁珠充分重懸，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下離心管。
b.加入600μL洗滌液II（檢查是否已加入無水乙醇），用移液器緩慢吹打磁珠10次或漩渦震蕩10 s，使磁珠充分重懸，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下離心管。
c.重復(fù)上述步驟b一次。
注：步驟c應(yīng)盡量除盡洗滌液。
（3）干燥：保持離心管于磁性分離器上，將其置于超凈工作臺(tái)中風(fēng)干至磁珠表面無明顯光澤（2-4 min）。
（4）洗脫：加入20~100μL洗脫液，用移液器緩慢吹打磁珠50次或漩渦震蕩1 min，使磁珠充分重懸，于55℃加熱5 min后，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中，此即為純化得到的病毒基因組，可保存于-20℃。
二．自動(dòng)化操作流程
可以適配市面上大部分品牌核酸提取儀，詳細(xì)參數(shù)請聯(lián)系我司技術(shù)支持或設(shè)備廠商技術(shù)支持。
注意事項(xiàng)
1. 操作之前，請務(wù)必認(rèn)真閱讀本產(chǎn)品說明書及操作指南。
2. 蛋白酶K干粉溶解后，可分裝儲(chǔ)存于-20℃，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 避免對磁珠進(jìn)行冷凍、離心等操作。
4. 磁珠取用前應(yīng)充分重懸均勻。
5. 磁珠干燥前，應(yīng)用移液器吸盡洗滌液。
6. 干燥過程中避免磁珠過度干燥，否則會(huì)嚴(yán)重降低核酸洗脫效率。
7. 建議使用質(zhì)量較好的離心管和移液器吸頭，避免因粘附磁珠而造成損失。
8. 在96孔板中進(jìn)行磁性分離操作時(shí)，磁珠吸附時(shí)間可適當(dāng)延長。
9. 使用前請檢查各組分是否存在析出情況，如有析出，請將試劑瓶置于60℃水浴加熱溶解后使用。
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