產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品介紹
RIPA裂解液(強(qiáng),無(wú)抑制劑)可用于裂解細(xì)胞/組織,有效提取細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜及細(xì)胞核蛋白,獲得的蛋白樣品可用于常規(guī)的蛋白分析,如Western Blot、IP等。本產(chǎn)品的主要成分為100 mM Tris-HCL(pH 8.0)、150 mM NaCl、1% Triton X-100、1% deoxycholic acid、0.1% SDS等。
UElandy提供的另外一款Western及IP細(xì)胞裂解液(W6001),其有效裂解成分為1% NP-40。相較于RIPA裂解液(強(qiáng),無(wú)抑制劑),其裂解能力相對(duì)較弱,但能夠滿足一般用戶需求。遇到某些難溶解蛋白的Western,若發(fā)現(xiàn)Western及IP細(xì)胞裂解液效果不是非常理想,可以嘗試使用裂解強(qiáng)度更高的RIPA裂解液(強(qiáng),無(wú)抑制劑)(R6166)。
以貼壁細(xì)胞(6孔板)舉例,每孔200 μL RIPA裂解液,100 mL試劑大概可以用于500個(gè)孔。
注意事項(xiàng)
1. RIPA裂解液(強(qiáng),無(wú)抑制劑)含有較高濃度的去垢劑,因此與Bradford法測(cè)定蛋白濃度不兼容,如需測(cè)定蛋白濃度可選本公司生產(chǎn)的BCA蛋白定量檢測(cè)試劑盒(B6167)。
2. RIPA裂解液(強(qiáng),無(wú)抑制劑)不含有蛋白酶或其他酶的抑制劑,使用前請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求加入酶抑制劑,以防蛋白降解。
3. 裂解過(guò)程需在冰上進(jìn)行。
4. 以Hela細(xì)胞為例,1 × 106 cells需要200 μL預(yù)冷的RIPA裂解液,該裂解液的量相對(duì)較充足,在有限細(xì)胞的情況下,如需提高蛋白濃度,可適當(dāng)減少裂解液的量。
5. 裂解產(chǎn)物中如若出現(xiàn)的一小團(tuán)透明膠狀物,屬于正?,F(xiàn)象,是含有基因組DNA的復(fù)合物。