產(chǎn)品概述：
儲(chǔ)存條件
RNase A: 50 mg/ml, 室溫貯存6個(gè)月；長(zhǎng)期貯存于-20℃。
溶菌酶：50%甘油溶解溶菌酶，使溶菌酶濃度為50 mg/ml,-20℃密閉貯存。
Buffer S: 細(xì)菌原生質(zhì)制備液，加入RNase A后，4℃密閉貯存。
0.25M EDTA: 室溫密閉貯存。
Buffer G-A: 裂解液，室溫密閉貯存。
Buffer G-B: 蛋白去除液，室溫密閉貯存。
Buffer DV-A: Buffer DV的制備液（請(qǐng)參照實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備Buffer DV的配制方法配制），室溫密閉貯存。
Buffer DV: 相分離液，室溫密閉貯存。
Buffer BV: DNA結(jié)合液，室溫密閉貯存。
Buffer W1: 洗滌液，室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate: 去鹽液。使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）并混合均勻，室溫密閉貯存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5,室溫密閉貯存。



流程圖

說明書：

 UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250    

常見問題解答：

◆洗脫產(chǎn)物的DNA量很少或沒有
·樣品量過多，使試劑處理能力不夠。
·裂解不充分 
溶菌酶失活（-20℃可放6個(gè)月）
溶菌酶作用時(shí)間不夠
·吸取下相時(shí)有上相的物質(zhì)污染
·buffer W2中未加無水乙醇或者使用了低濃度的乙醇代替了無水乙醇。 
·DNA洗脫效率不高
最后一次buffer W2洗滌完后不要將制備管放于負(fù)壓裝置上抽的過干。

◆A260/280比值過低
·樣品量過多
·細(xì)菌裂解不完全
·吸取下相時(shí)有中相層物質(zhì)污染

◆RNA污染 (A260/280比值偏高)
·未將RNase A加入到buffer S中
·RNase A失活或者酶量不夠

◆基因組DNA有降解
完全降解的基因組DNA在凝膠電泳上會(huì)出現(xiàn)模糊的條帶或者是拖尾現(xiàn)象。
·菌液不新鮮，細(xì)胞凋亡導(dǎo)致DNA降解
·操作過于劇烈導(dǎo)致DNA被機(jī)械打斷
·未能有效抑制內(nèi)源核酸酶作用
溶菌酶裂解時(shí)間過長(zhǎng)，沒有及時(shí)加入EDTA并且低溫操作。

◆基因組DNA酶反應(yīng)效果不佳
·DNA純度低
樣品過多導(dǎo)致裂解不充分，從而引起大量蛋白、多糖、脂類等雜質(zhì)殘留，影響后續(xù)酶切反應(yīng)效果。可適當(dāng)減少樣品初始量。
·鹽分污染：可以用2× Buffer W2進(jìn)行洗滌
·乙醇污染：在最后一次Buffer W2洗滌后可將制備管由原來離心1min 增加至離心2min

◆濾器或者制備管堵孔
·樣品過多
·裂解不充分