產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品參數(shù)
外觀:可溶于乙醇、DMF、DMSO的深紅色固體
Ex/Em (MeOH) = 549/565 nm
CAS號(hào):41085-99-8
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.9
分子結(jié)構(gòu)圖:
儲(chǔ)存條件
-20℃避光保存,有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
DiI作為示蹤劑或長(zhǎng)期示蹤劑(long-term tracer),可以被廣泛用于正向或逆向、活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織。DiI通常不會(huì)影響細(xì)胞的生存力(viability)。被DiI標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下可以存活長(zhǎng)達(dá)4周,在體內(nèi)可以長(zhǎng)達(dá)一年。DiI在被固定的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的遷移速率為0.2-0.6 mm/day,在活的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的的遷移速率為6 mm/day。
DiI除了用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附、發(fā)育或移植過程中細(xì)胞的遷移,通過FRAP(光脫色熒光恢復(fù)技術(shù))檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
DiI染色后可進(jìn)行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他試劑)的固定,但不建議在染色后進(jìn)行透化的過程。此外,在固定透化(室溫下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地進(jìn)行質(zhì)膜染色。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液濃度10 μM計(jì)算,10 mg配置為工作液大概可以用10707次。
注意事項(xiàng)
1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底,再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. DiI染色固定的細(xì)胞或組織樣品時(shí),通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。
3. 熒光染料均存在淬滅問題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆在細(xì)胞膜和細(xì)胞核雙染實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞膜染色用DiI,細(xì)胞核染色用DAPI,細(xì)胞固定后,先染色DiI還是先染色DAPI?
先用DiI對(duì)細(xì)胞膜進(jìn)行染色,后用DAPI染核
◆DiI細(xì)胞膜染料,除了在549nm下有紅光外,在488nm下有綠色嗎?
該染料在488nm激發(fā)處,有微弱的激發(fā),如果染料濃度太大或者曝光太強(qiáng)的話,會(huì)在488nm處有微弱的熒光,建議調(diào)整曝光和染料濃度
◆DiI也可以染色細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器膜嗎?
可以,因?yàn)镈iI染色細(xì)胞膜是非特異性的,所以細(xì)胞器的膜也會(huì)被染上色,如果不想細(xì)胞器染色太明顯,可以減少孵育時(shí)間或者將染料濃度降低
◆細(xì)胞追蹤有很多產(chǎn)品,該如何選擇?
首先確定追蹤細(xì)胞的時(shí)間,然后考慮染料結(jié)合機(jī)制。
1.鈣黃綠素染料(C4041)標(biāo)記均勻且對(duì)短期細(xì)胞遷移示蹤效果極佳,但也會(huì)被某些類型細(xì)胞迅速外排。
2.親脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能標(biāo)記細(xì)胞膜而不破壞其功能,并且能持續(xù)更長(zhǎng)時(shí)間,但如果發(fā)生膜融合則可能會(huì)染上其他細(xì)胞。此外,它們還會(huì)在透化過程中丟失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于長(zhǎng)期標(biāo)記,其帶有溫和的氯甲基反應(yīng)基團(tuán)使之能夠與細(xì)胞組分共價(jià)結(jié)合。
4.CFDA SE(C4070)也能共價(jià)地結(jié)合于細(xì)胞組分。
在所有列出的試劑中,細(xì)胞內(nèi)保留與否取決于細(xì)胞分裂的速率和細(xì)胞的固有特性(主動(dòng)外排,膜和蛋白質(zhì)的周轉(zhuǎn)率等)。其中共價(jià)結(jié)合試劑比非共價(jià)結(jié)合的試劑展現(xiàn)出更長(zhǎng)的保留時(shí)間
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn):
1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang,Xiaoyou Wang,Jie Li,Yu Nie,Guojian Liao,Yang Yu,Chong Li
ACS NANO
應(yīng)用方向:細(xì)胞膜染色
- Yixuan Tang ,
- Shuang Wu ,
- Jiaqi Lin ,
- Liting Cheng ,
- Jing Zhou ,
- Jing Xie ,
- Kexin Huang ,
- Xiaoyou Wang ,
- Yang Yu ,
- Zhangbao Chen ,
- Guojian Liao , and
- Chong Li*
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
應(yīng)用方向:標(biāo)記示蹤
應(yīng)用方向:細(xì)胞遷移
應(yīng)用方向:細(xì)胞融合
應(yīng)用方向:細(xì)胞粘附
應(yīng)用方向:FRAP檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散
應(yīng)用方向:標(biāo)記脂蛋白
應(yīng)用方向:DiI標(biāo)記外泌體,注射入小鼠海馬齒狀回(DG)區(qū),觀察外泌體在皮質(zhì)層的遷移