產(chǎn)品概述:
儲存條件
4℃避光保存,有效期見外包裝。
產(chǎn)品參數(shù)
Ex/Em:480/520 nm(結(jié)合dsDNA)
產(chǎn)品介紹
PicoGreen是熒光檢測dsDNA并進行定量的一種產(chǎn)品,這種方法非常靈敏。常用于分子生物學(xué)技術(shù):cDNA文庫的構(gòu)建、亞克隆的DNA片段純化及應(yīng)用,比如進行DNA定量、產(chǎn)物擴增和引物的進一步檢測。常規(guī)的DNA含量的檢測方法是在260 nm處測其吸光值。這種方法的主要缺點是核苷酸、單鏈核酸和蛋白質(zhì)對信號的影響很大,并且還會受到核酸制備過程中污染物的干擾,無法區(qū)分DNA和RNA,而且這種方法不靈敏(5 μg/mL dsDNA溶液A260=0.1)。PicoGreen定量檢測方法簡單、方便,成為生物制品殘留DNA檢測的標準。
PicoGreen只有與dsDNA結(jié)合后才發(fā)出熒光,并且所發(fā)熒光強度與DNA濃度成正比。PicoGreen可以檢測出25 pg/mL-1000 ng/mL范圍內(nèi)的dsDNA,且線性關(guān)系較好(R2>0.99)。
對于終體積為200 μL的檢測體系,0.1 mL規(guī)格可檢測200個樣本,1 mL規(guī)格可檢測2000個樣本。
注意事項
1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底,再進行后續(xù)實驗。
2. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
3. PicoGreen工作液最好現(xiàn)配現(xiàn)用,以保證最佳結(jié)果。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆我試圖對一些帶有熒光基團標記的DNA進行定量。這可行嗎?
PicoGreen 染料和其它基于熒光定量的試劑不建議用于對染料偶聯(lián)的核酸進行定量。核酸上攜帶的染料基團會干擾定量試劑的結(jié)合或熒光產(chǎn)生。
◆該染料能否耐受污染物?
基本不受ssDNA和RNA的影響,并且可以耐受一定濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白等干擾。
◆該染料能檢測哪些DNA?
可檢測多個來源的DNA,包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴增產(chǎn)物
使用本產(chǎn)品的文獻:
1.Assembly Mechanism of Highly Crystalline Selenium-Doped Hydroxyapatite Nanorods via Particle Attachment and Their Effect on the Fate of Stem Cells
Yan Li,Hang Hao,Zhengyu Zhong,Mengdie Li,Jiaqi Li,Yingying Du,Xiaodan Wu,Jianglin Wang,Shengmin Zhang
ACS Biomaterials Science&Engineering
應(yīng)用方向:dsDNA含量測定
引用文獻
1.Detection of mitochondrial DNA depletion in living human cells using PicoGreen staining
應(yīng)用方向:胞內(nèi)原位染色人線粒體DNA(mtDNA)
應(yīng)用方向:測量植物組織中DNA濃度
應(yīng)用方向:PCR產(chǎn)物定量