儲(chǔ)存條件：-20℃避光冷藏，其中B組份也可4℃保存。為避免反復(fù)凍融，A與C組份建議分裝。有效期見(jiàn)外包裝。

產(chǎn)品組分

產(chǎn)品介紹

線(xiàn)粒體膜電位降低是細(xì)胞早期凋亡的一個(gè)標(biāo)志，它發(fā)生在細(xì)胞膜上的磷酯酰絲氨酸外翻與Caspase水解酶激活之前。當(dāng)線(xiàn)粒體膜通透性發(fā)生改變時(shí)，膜電位會(huì)降低。這種膜電位的改變是由于Bax二聚體的形成和 Bid, Bak, Bad的激活，從而誘導(dǎo)線(xiàn)粒體膜形成孔隙造成的。當(dāng)這些促凋亡蛋白被激活時(shí)，線(xiàn)粒體同時(shí)也將細(xì)胞色素C釋放到細(xì)胞質(zhì)中。

JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線(xiàn)粒體膜電位△ Ψm的理想熒光探針，它可以檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線(xiàn)粒體膜電位。在線(xiàn)粒體膜電位較高時(shí)，JC-1聚集在線(xiàn)粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，產(chǎn)生紅色熒光；在線(xiàn)粒體膜電位較低時(shí)，JC-1不能聚集在線(xiàn)粒體的基質(zhì)中，此時(shí)JC-1為單體，可以產(chǎn)生綠色熒光。通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到膜電位的下降，同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。

JC-1單體的最大激發(fā)波長(zhǎng)為510 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm；JC-1 聚合物的最大激發(fā)波長(zhǎng)為585 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為590 nm。本試劑盒操作簡(jiǎn)單快速，可以通過(guò)流式細(xì)胞儀，熒光顯微鏡或熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)提供了CCCP作為誘導(dǎo)線(xiàn)粒體膜電位下降的陽(yáng)性對(duì)照。

注意事項(xiàng)

1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2. JC-1(100× in DMSO)在較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

3. 配制JC-1染色工作液時(shí)，必須先把試劑盒提供的JC-1(100× in DMSO)用滅菌diH2O充分溶解混勻后，才可以加入10× Assay Buffer。不可先配制1× Assay Buffer再加入JC-1(100× in DMSO)，這樣JC-1會(huì)很難充分溶解，會(huì)嚴(yán)重影響后續(xù)的檢測(cè)。

4. JC-1染色完成后用1× Assay Buffer洗滌時(shí)，使1× Assay Buffer保持4℃左右，此時(shí)的洗滌效果較好。

5. JC-1染色并洗滌完成后盡量在30分鐘內(nèi)完成后續(xù)檢測(cè)。在檢測(cè)前需冰浴保存。

6. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

7. 本產(chǎn)品僅限于科研，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

8. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

無(wú)論您使用哪種染料，四甲基羅丹明甲酯（TMRM）還是MitoTracker Red FM，未處理的細(xì)胞都會(huì)發(fā)出熒光。只要細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位降低就會(huì)導(dǎo)致熒光信號(hào)降低，最重要的是變化的程度。當(dāng)線(xiàn)粒體膜電位發(fā)生改變時(shí)，JC-1染料不僅強(qiáng)度改變，還有激發(fā)和發(fā)射比例光譜的改變。設(shè)置未處理的對(duì)照和用線(xiàn)粒體膜電位去穩(wěn)定劑（如CCCP或FCCP）處理的陽(yáng)性對(duì)照是非常重要的。這些染料僅用于活細(xì)胞，在固定處理的細(xì)胞中無(wú)法保留相同程度的信號(hào)。

◆用PFA固定是否可行（現(xiàn)場(chǎng)成像后，用于儲(chǔ)存）？或者這會(huì)干擾染料信號(hào)嗎？
如果您想保持JC-1染料和固定后檢測(cè)到的線(xiàn)粒體膜電位之間的關(guān)系，這是不可能的，這是因?yàn)镴C-1依賴(lài)于線(xiàn)粒體膜電位，而線(xiàn)粒體膜電位將被固定所消除。

◆請(qǐng)問(wèn)做JC-1培養(yǎng)板該如何選擇？比如用酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度的話(huà)是否一定需要在避光培養(yǎng)板中做？普通的透明板可以嗎？如果用熒光顯微鏡觀察拍照的話(huà)又應(yīng)該用什么板呢？
熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)的話(huà)要選用黑色的酶標(biāo)板，熒光顯微鏡拍照的話(huà)可以用透明的板子

◆請(qǐng)問(wèn)，對(duì)于從動(dòng)物組織中用線(xiàn)粒體提取試劑盒提取出來(lái)的線(xiàn)粒體，用CCCP設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組時(shí)，應(yīng)該用什么濃度處理多長(zhǎng)時(shí)間，不同組織中提純出來(lái)的線(xiàn)粒體，處理方式是否不同？
純化的線(xiàn)粒體不適合用于CCCP做陽(yáng)性對(duì)照

◆可以用來(lái)組織切片染色嗎，如果可以需要注意什么呢？適用于組織的流式檢測(cè)嗎?
需要新鮮組織，先提取純化線(xiàn)粒體再檢測(cè),可能不太適合做流式

◆請(qǐng)問(wèn)CCCP對(duì)細(xì)胞膜電位的抑制作用可以有多長(zhǎng)，我想測(cè)試長(zhǎng)時(shí)間的48h？之后再染JC-1，有什么建議嗎？
對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10μM CCCP處理20分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)完全喪失，JC-1染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料確定

◆你好，請(qǐng)問(wèn)染完色后，用抗淬滅劑封片后免疫熒光顯微鏡觀察，鏡下觀察細(xì)胞會(huì)移動(dòng)，拍出來(lái)的照片是模糊的，請(qǐng)問(wèn)出現(xiàn)這種情況一般考慮什么問(wèn)題？怎么解決呢？
可能是細(xì)胞沒(méi)固定的原因，一般可以在孔板里染色后直接用倒置顯微鏡在孔板里觀察，不用封片

◆請(qǐng)問(wèn)用純化的線(xiàn)粒體比直接用細(xì)胞測(cè)流式有什么優(yōu)勢(shì)嗎？是孵育的時(shí)間比較短嗎？直接用細(xì)胞做的，趨勢(shì)不明顯，如果提取線(xiàn)粒體后去測(cè)會(huì)不會(huì)得到更明顯的結(jié)果？
提取的純化線(xiàn)粒體是細(xì)胞器一般建議用熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)相應(yīng)的紅綠熒光值，純化的線(xiàn)粒體染色更好染一些，相對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō)可能會(huì)更好檢測(cè)一些

Redox biology

3.Salvia miltiorrhiza Bge. processed with porcine cardiac blood inhibited GLRX5-mediated ferroptosis alleviating cerebral ischemia-reperfusion injury

Shikang Zhou,Ziqi Wang,Ting Wang,Chunhua Peng,Jinyun Zhang,Chanming Liu,Jianda Xu,Yi Zhang,Li Zhang,Libo Luo,Xiaojing Yan

4.Oral microsphere formulation of M2 macrophage-mimetic Janus nanomotor for targeted therapy of ulcerative colitis

Ruifeng Luo, Jinwei Liu, Qian Cheng, Mitsuhiko Shionoya, Cheng Gao, Ruibing Wang

5.https://www.sciopen.com/article/10.26599/FSHW.2024.9250214

Ruo-Lan Li, Wen-Wen Chen, Hong Zhang, Qi Liang, Ling-Yu Wang, Wei Peng, Chun-Jie Wu