產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品介紹
Qbtest®X-Green II雙鏈DNA定量試劑盒是熒光檢測dsDNA并進行定量的一種產(chǎn)品,這種檢測方法非常靈敏,常用于分子生物學中cDNA文庫的構(gòu)建和亞克隆DNA片段的純化。常規(guī)的DNA含量檢測方法是在260 nm處測其吸光值。這種方法的主要缺點是核苷酸、單鏈核酸和蛋白質(zhì)對信號的影響很大,并且還會受到核酸制備過程中污染物的干擾,無法區(qū)分DNA和RNA,而且靈敏度低(5 μg/mL dsDNA溶液A260=0.1)。Qbtest®X-Green II雙鏈DNA定量試劑盒檢測方法簡單方便,已成為生物制品殘留DNA檢測的標準。
Qbtest®X-Green II只有與dsDNA結(jié)合后才發(fā)出熒光,并且熒光強度與DNA濃度成正比。Qbtest®X-Green II雙鏈DNA定量試劑盒升級款檢測濃度范圍10 pg/μL~100 ng/μL、檢測質(zhì)量范圍0.2~100 ng,且線性關(guān)系較好(R2 > 0.99)。
應用范圍
dsDNA定量、NGS二代測序、文庫構(gòu)建
產(chǎn)品貨號
Q2038S/Q2038L
儲運條件
4℃避光保存,有效期見外包裝;長期保存可以儲存在-20℃。冰袋運輸。
產(chǎn)品特點
特異性好:特異性結(jié)合dsDNA,對常規(guī)污染物具有耐受性;
靈敏度高、范圍廣:檢測濃度范圍10 pg/μL~100 ng/μL,檢測質(zhì)量范圍0.2~100 ng且線性關(guān)系較好(R2 > 0.99。
產(chǎn)品組分
組分 |
Q2038S (100 T) |
Q2038L (500 T) |
A. Qbtest®X-Green II |
250 μL |
1.25 mL |
B. Qbtest®1×Buffer |
50 mL |
250 mL |
C. Qbtest®dsDNA標準液1 |
1 mL |
5 mL |
D. Qbtest®dsDNA標準液2 |
1 mL |
5 mL |
產(chǎn)品參數(shù)
Ex/Em:480/520 nm(結(jié)合dsDNA)
光譜圖:
注意事項
1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底,再進行后續(xù)實驗。
2. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
3. 最好現(xiàn)配現(xiàn)用1×Qbtest®X-Green II工作液,以保證最佳結(jié)果。
4. 本產(chǎn)品僅限于科研,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
自備材料
1. 耗材
0.5 mL離心管
2. 儀器
Qubit 3.0/Qubit 4.0
常見問題解答:
◆該試劑盒能否指示核酸樣品中的樣品質(zhì)量?
不可以。該試劑盒只能定量樣品中dsDNA的含量。Qbtest熒光計無法通過吸光度讀數(shù)來提供A260/A280比率或檢測核酸樣品中的蛋白質(zhì)。這可以通過NanoDrop儀器完成。 如果您的樣品含有可能影響檢測的蛋白質(zhì)或其他污染物,則應進一步純化。
◆與酶標儀相比,使用Qbtest熒光計的Qbtest定量分析的準確性和靈敏度如何?
Qbtest定量分析的準確度和靈敏度與酶標儀相同。這是產(chǎn)品開發(fā)過程中的要求。
◆使用Qbtest熒光計時讀數(shù)隨著時間降低。這是為什么?
(1)確保孵育2分鐘后再讀取讀數(shù)(對于蛋白,孵育時間為15分鐘)。
(2)如果你將試管留在Qubit 熒光計內(nèi)并多次讀數(shù),那么讀數(shù)將隨著試管在儀器內(nèi)的升溫而降低。如果你需要讀取多個讀數(shù),請將試管從儀器中取出,放置于試管架上,讓它與室溫平衡至少30秒,然后再重新讀取讀數(shù)。
(3)如果樣本是避光保存的,那么你可以在混勻后3小時內(nèi)讀取讀數(shù)。超過這一時間,讀數(shù)將不準確。
(4)在讀取間隔,將標準品和樣本試管保存于黑暗避光處。
◆DNA長度對dsDNA檢測結(jié)果有影響嗎?
大致在20-mer或更短范圍內(nèi)的鏈信號水平較低。對于大部分由短鏈組成的dsDNA樣本,仍可使用試劑,但應使用與樣本長度相當?shù)膁sDNA標準品。
使用本產(chǎn)品的文獻:
引用文獻
1.Evaluation of PCR amplification bias by terminal restriction fragment length polymorphism analysis of small-subunit rRNA and mcrA genes by using defined template mixtures of methanogenic pure cultures and soil DNA extracts
應用方向:dsDNA定量
2.Automated template quantification for DNA seqUEncing facilities
應用方向:質(zhì)粒DNA定量