化學(xué)發(fā)光，無需激發(fā)波長。螢火蟲螢光素發(fā)射波長是 560 nm。

◆推薦儀器？多功能酶標(biāo)儀能用嗎？
1、推薦儀器：具有生物化學(xué)發(fā)光檢測模塊。螢光素產(chǎn)生的光可以被光度計或閃爍計數(shù)器檢測。常見的活體成像儀器：如 IVIS? Lumina 小動物活體成像系統(tǒng)，德國 Bruker公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小動物活體成像儀。
2、多功能酶標(biāo)儀：需要和儀器廠家確認(rèn)是否具體生物化學(xué)發(fā)光檢測模塊。注：不能用熒光顯微鏡。

◆底物可以進(jìn)入活細(xì)胞中或者血腦屏障嗎？
D-螢光素約280道爾頓，螢光素的水溶性和脂溶性都非常好，可以通過血腦屏障，胎盤屏障和血液測試屏障，也可以進(jìn)入活細(xì)胞。

◆活體成像實(shí)驗(yàn)，無效果的原因？
成功進(jìn)行活體成像實(shí)驗(yàn)需要以下條件：
1）目的組織或細(xì)胞表達(dá)螢光素酶基因；
2）螢光素底物注射成功；
3）依賴于發(fā)光部位的組織厚度。實(shí)驗(yàn)不成功，可從上述因素查找，螢光素酶基因是否表達(dá)，螢光素底物是否未正確注射，及發(fā)光部位較深等

◆產(chǎn)品不小心放在室溫下或暴露在光線下了，還可以用嗎？
產(chǎn)品在室溫下可以穩(wěn)定保存很多天，因此產(chǎn)品很可能仍然可以正常工作。 為安全起見，我們建議在處理大量樣品或珍貴樣品之前，先進(jìn)行小規(guī)模陽性對照實(shí)驗(yàn)，以確認(rèn)該產(chǎn)品仍然適用于您的應(yīng)用。

◆兩者的區(qū)別是什么？
螢光素鉀鹽和螢光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別，兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來看，鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽，尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，兩者功效相同。

◆活體成像有必要建立螢光素酶動力學(xué)曲線嗎？
注射方式，動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做螢光素酶動力學(xué)曲線，確定最佳信號平臺期和最佳的檢測時間。